Mikroskoopin dioja käytetään yksisoluisten organismien tutkimiseen ja pienten kasvien ja organismien läheltä katsomiseen. Valmiita dioja on kahdenlaisia: kuiva- ja märätelineet. Jokaista valmistusmenetelmää käytetään erityyppisten kennojen asentamiseen. Jos asennat märkäasteikolla erityisen vaaleaa tai läpikuultavaa näytettä, saatat joutua värjäämään näytteen niin, että se näkyy mikroskoopin alla.
Askeleet
Menetelmä 1: 3: Kuivan telineen valmistelu
Vaihe 1. Valitse puhdas dia
Pidä diaa valonlähteen vieressä ja katso läpi varmistaaksesi, ettei siinä ole tahroja ja likaa. Useimmat mikroskoopin diat ovat litteitä ylhäältä ja alhaalta ja suorakulmaisia. Ne ovat kirkkaita, jolloin mikroskoopin valo pääsee läpi ja valaisee läpikuultavan näytekappaleen. Jos dia on likainen tai tahriintunut, et voi tutkia näytettäsi tehokkaasti.
Jos huomaat, että mikroskoopin objektilasilla on likaa-myös omat sormenjälkesi-pese se nopeasti nestesaippualla ja vedellä. Kuivaa liina puhtaalla liinalla. Älä käytä paperipyyhkeitä tai paperipyyhkeitä, koska ne voivat jättää nukkaa taakse
Vaihe 2. Tarkista näyte, onko se leikattava
Näytteen on oltava läpikuultava (tai puoliläpinäkyvä) tai läpinäkyvä, jotta valo pääsee läpi. Jos valo ei pääse kokonaan näytteen läpi mikroskoopin okulaariin, et voi nähdä näytettä mikroskoopin läpi.
Jotkut näytteet (esim. Hiuslanka tai hyönteisten siipi) ovat itsessään ohuita ja läpikuultavia, eikä niitä tarvitse leikata partaterällä
Vaihe 3. Leikkaa ohut näytekappale pois
Käytä partaterää leikataksesi näytemateriaalisi ohuiksi, läpikuultaviksi viipaleiksi. Kuivat kiinnikkeet on helpoin valmistaa, koska ne eivät käytä nestettä luistin ja näytteen välillä. Kuivakiinnike on ihanteellinen näytteiden tarkastamiseen, jotka eivät ole kuivumisvaarassa. Yleensä kuivakiinnitettäviä materiaaleja ovat:
- Korkki- tai balsapuuta.
- Kukan terälehtiä tai lehtiä.
- Hyönteisten jalat tai siivet.
- Hiuksia, turkista tai höyheniä.
Vaihe 4. Aseta näyte objektilasille
Poimi näytekappaleen ohut siivu käyttämällä pihtejä. Aseta se herkästi dian toiselle puolelle. Jos käytät koveraa diaa (jossa toinen puoli putoaa alas), aseta näyte koveran alueen keskelle.
- Asenna näyte koveralle luistille, jos olet huolissasi siitä, että näyte rullaa tai liukuu tasaisesta luistista. Käytä esimerkiksi koveraa diaa, jos valmistat käpristynyttä terälehteä, joka rullaa toiselle tai toiselle puolelle.
- Kaikille muille näytteille litteä dia toimii hyvin.
Vaihe 5. Aseta kansilevy näytekappaleen päälle
Kansi estää sen, että näytekappale putoaa luistilta. Luiska suojaa myös näytekappaletta siltä varalta, että yksi mikroskoopin käyttäjistä laskee linssin vahingossa niin alas, että se koputtaa näytettä.
- Peitelevyt ovat hyvin ohuita, läpinäkyviä lasia tai yleisemmin muovia. Jokainen lipsahdus on noin 3⁄4 1,9 cm leveä ja pitkä.
- Valmis diasi on nyt valmis tarkastettavaksi mikroskoopin alla.
Tapa 2/3: Märän telineen valmistelu
Vaihe 1. Lisää 1 tippa vettä objektilasille
Tiputa tippa vettä 1 tippa vettä tasaisen tai koveran dian keskelle. Tämä vesipisara antaa märälle kiinnikkeelle nimen. Neste pitää näytteenäytteen kosteana ja estää märkiä orgaanisia näytteitä kuivumasta ja vääristämästä muotoaan. Vesi säilyttää myös eläviä yksilöitä, kuten yksisoluisia organismeja.
Jos haluat tehdä pysyvän dian kuolleesta orgaanisesta materiaalista, voit käyttää ohutta kerrosta kirkasta kynsilakkaa vesipisaran sijasta
Vaihe 2. Kaavi tai viipaloi osa märkänäytteestä
Näytekappaleet, joita käytetään märissä kiinnikkeissä, ovat tyypillisesti märkää tai elävää orgaanista materiaalia. Käytä partaveitsiä tai hammastikkua leikkaamaan tai kaavimaan pieni määrä märkää näytettä. Materiaaleja, joita käytetään yleisesti märkäkiinnityselementtien valmistamiseen, ovat:
- Poskisolut tai hammaskivi (kaavittu suustasi hammastikulla).
- Ohut poikkileikkaus kasvin varresta (leikattu partakoneen terällä).
- Jos tutkit yksisoluisia organismeja, esimerkiksi ameba tai paramecium-pinsetit eivät tee hyvää. Käytä sen sijaan puhdasta silmätippoa pari tippaa vettä, jossa yksisoluiset organismit tai levät uivat.
Vaihe 3. Aseta näyte vesipisaraan
Käytä näytteenäytteesi materiaalityypistä riippuen näytteen siirtämiseen objektilasille pihtejä, pinsettejä tai hammastikkua. Aseta näyte vesipisaran keskelle niin, että se suspendoituu nesteeseen.
Jos käytät pipettiä yksisoluisten organismien keräämiseen, aseta 1 tai 2 tippaa vesiliukumäkeen, joka on jo luistilla
Vaihe 4. Aseta peitelevy märän näytteen päälle
Pidä kansilehteä 45 ° kulmassa. Aseta yksi reuna alas näytteen viereen vesipisaralla. Laske sitten luistin toinen puoli, kunnes se on tasainen näytteen päällä. Sinun pitäisi nähdä vesipisarat, jotka leviävät kansilevyn alle, kunnes ne saavuttavat reunat.
Älä napauta tai paina kansilehteä, kun se on paikallaan. Jos teet niin, vaarana on näytekappaleen ja veden poistaminen luistilta
Menetelmä 3/3: Solunäytteiden värjäys
Vaihe 1. Aseta paperipyyhearkki kansilehden toista reunaa vasten
Aseta pyyhe luistin reunaa vasten häiritsemättä kansilasin alla olevaa materiaalia. Imukykyinen paperipyyhe imee osan vedestä peitelevyn alta ja vetää värjäysaineen kansilevyn alle ja näytteen päälle.
- Jos märkäasenteinen diaesitys on vaalea tai väritön (esim. Poikkileikkaus värittömästä kasvien varresta), sitä voi olla vaikea nähdä mikroskoopin läpi. Näytteen värjäys auttaa sinua näkemään paremmin sen muodon ja rakenteen.
- Tämä tehdään yleensä sen jälkeen, kun olet jo tutkinut märän näytteen objektilasissa värjäämättä sitä. Dia voi olla jo valmiina, vaikka se ei ole värjätty.
Vaihe 2. Aseta 1 tippa jodia tai metyleenisinistä kansilehden toiselle puolelle
Käytä silmätippoa ja pudota värjäyskemikaali mikroskooppilevyn päälle, suoraan kansilevyn viereen. Varo, että annat vain 1 tipan. Liika värjäysaine voi valua luistilta.
- Jodia tai metyleenisinistä voi ostaa mistä tahansa opetuskaupasta tai biologian tarvikekaupasta.
- Vaihtoehtoinen tapa tehdä tämä on lisätä pisara värjäysainetta veteen märkäasenteisella luistilla, kun valmistat sen ensimmäisen kerran. Tässä tapauksessa et tarvitse paperipyyhettä.
Vaihe 3. Odota, kunnes värjäysaine vedetään liukukannen alle
Värjäysaine alkaa vuotaa kansilevyn alle, kun paperipyyhe vetää vettä toiselta puolelta. Voi kestää jopa 5 minuuttia, ennen kuin jodi tai metyleenisininen liukenee kokonaan liukukannen alle ja kyllästää näytteen.
Kun jodi tai metyleenisininen on vetäytynyt kokonaan liukukannen alle, näyte on täysin värjätty
Vaihe 4. Pyyhi ylimääräinen värjäysaine puhtaalla paperipyyhkeellä
Puhdista luistin pinta niin, ettei irtonaisia nesteitä läikky sivulta. Märkäasennus on nyt värjätty ja valmis tarkkailtavaksi mikroskoopilla.
